LC-MS-unterstützte Untersuchungen zum Metabolismus des Sigma-1-Rezeptorliganden (–)-(S)-[¹⁸F]Fluspidine

Ziel: In einer jüngst begonnenen klinischen Studie (1) wird die Veränderung der Verfügbarkeit von Sigma-1-Rezeptoren bei Patienten mit Depression mittels (–)-(S)-[¹⁸F]Fluspidine (2) und PET untersucht. Neben der Bestimmung des Anteils an Radiotracer in Plasma und Urin, war die Strukturaufklärung nachgewiesener Radiometaboliten Gegenstand unserer Arbeiten.

Methodik: Nach Injektion von 255±9 MBq (n=3) (–)-(S)-[¹⁸F]Fluspidine, wurden Plasma (15, 30 min p.i.) und Urin (120 min p.i.) der Versuchsteilnehmer per Radio-HPLC untersucht. Für In-vitro-Studien wurden der Radiotracer bzw. unmarkiertes (–)-(S)-Fluspidine jeweils mit Lebermikrosomen des Menschen (HLM) sowie NADPH und /oder aktivierter Glucuronsäure (UDPGA) bei 37°C in PBS-Puffer inkubiert und die Ansätze mittels Radio-HPLC bzw. LC-MS untersucht. Mit Hilfe verschiedener MS-Methoden (z. B. EPI, MS³) wurden Strukturen von Metaboliten identifiziert und im Menschen gebildeten Radiometaboliten zugeordnet.

Ergebnisse: Bei ersten Messungen an Probanden lag der Anteil an (–)-(S)-[¹⁸F]Fluspidine im Plasma nach 30 min bei 85%. Die Extraktionsausbeute der Plasmafällung betrug 96-98%. Im Urin wurde ein Radiotracer-Anteil von 0 - 4% (120 min, p.i., n=3) bestimmt. Es wurden 3 Hauptmetaboliten detektiert. Durch Inkubation mit HLM wurden unter oxidativen Bedingungen, Metaboliten in vitro gebildet. Mit UDPGA wurde zudem die Bildung von Glucuroniden beobachtet, von denen eines chromatographisch mit einem im Menschen gefundenen Haupt-Radiometaboliten übereinstimmt. LC-MS-Untersuchungen zeigten, dass dieser durch Glucuronidierung infolge einer Oxidation am nicht-benzylischen Molekülteil entstand.

Schlussfolgerungen: Erste klinische Untersuchungen zeigten eine für die Anwendung geeignete metabolische Stabilität, wobei einer der Hauptmetaboliten bereits identifiziert werden konnte. Über weitere Daten im Studienverlauf sowie über Strukturaufklärung wird berichtet.

Literatur:

(1) DRKS-ID:DRKS00008321
(2) Fischer et al. Eur J Nucl Med Mol Imaging (2011) 38: 540-551