Charakterisierung der Neurotensin-Rezeptoren als potentielles Target für die Tumordiagnose via Radiomarkierung

Ziel/Aim:

Peptidrezeptoren sind auf Grund ihrer gesteigerten Expression im Tumorgewebe für das molekulare Imaging von großem Interesse. Das molekulare und biochemische Verständnis dieser Rezeptoren wird für die Entwicklung repräsentativer Liganden via Radiomarkierung für die Tumordiagnose und Therapie genutzt. Die Charakterisierung der Neurotensin- Rezeptor (NTR) Familie als wichtiges Target für die Tumordiagnose und Therapie ist Gegenstand dieser Arbeit.

Methodik/Methods:

In der vorliegenden Arbeit wurde die Expression der NTR in kultivierten HT-29 (humanes Adenokarzinom) und FaDu ( humanes Plattenepithelkarzinom) Zellen sowie in den entsprechenden xenogenen Tumortransplantaten untersucht. Die mRNA Genexpression wurde mittels real-time PCR mit spezifischen Primern für die drei Rezeptorsubtypen quantifiziert. Die Analyse der Rezeptor-Proteinexpression erfolgte mittels Autoradiographie mit Tritium markierten Neurotensin und immunhistochemisch mit spezifischen Antikörpern gegen NTR1, 2 und 3.

Ergebnisse/Results:

Die Quantifizierung auf mRNA Ebene ergab in den HT-29 und FaDu Zellen eine 3,5fach höhere Expression von NTR3 im Vergleich zu NTR1. Die Expression von NTR3 im Vergleich zu NTR2 war um den Faktor 2,5 erhöht. Die mRNA Rezeptorverteilung in den entsprechenden Tumortransplantaten verhielt sich für NTR3 ähnlich stark wie in den Zellen. Ebenfalls konnte in den Transplantaten eine gesteigerte Expression von NTR1 um das 2fache für die HT-29 Transplantate und das 1,4fache für die FaDu Transplantate beobachtet werden. Auf Proteinebene wurde ein starkes immunpositives Signal für NTR1 in den Zellen und Geweben detektiert. Rezeptorprotein für NTR3 konnte in unseren Untersuchungen nicht nachgewiesen werden.

Schlussfolgerungen/Conclusions:

Aufgrund der hohen Proteinexpression, scheint NTR1 für die Tumordiagnose ein geeignetes Target via Radiomarkierung zu sein. Überdies stellt NTR 1 als G-Protein gekoppelter Rezeptor eine wichtige Funktion bei der intrazellularen Signalübertragung dar und ist zudem ein interessantes Target für die Entwicklung therapeutisch wirksamer Medikamente.